如何正確選擇激發(fā)濾光片和熒光濾光片

激發(fā)濾光片與熒光濾光片的要點是確保它們都能有效分離和選擇物質的激發(fā)光與發(fā)射熒光的特征波段光譜，同時最大限度地減少背景光源的干擾。

激發(fā)濾光片的選擇

激發(fā)濾光片主要用于選擇透過某個波段的光，以激發(fā)熒光染料。在熒光顯微鏡中，激發(fā)濾光片的作用是僅允許激發(fā)熒光的波長通過。其選擇主要基于待測物質的激發(fā)光譜特性，即需要選擇與待測物質激發(fā)光譜的最大峰值波長相近的最大透射比的濾光片。

激發(fā)濾光片的類型有多種，如干涉濾光片、膠膜濾光片和玻璃濾光片，選擇合適的類型也是根據具體的實驗需求和應用場景。激發(fā)光源的強度對濾光片的壽命也有影響，因此選擇時也需要考慮光源的強度。

熒光濾光片的選擇

熒光濾光片主要用于觀察和分離熒光材料發(fā)射的特定波長光，熒光濾光片的選擇原則是盡可能讓熒光即發(fā)射光通過，同時最大程度阻擋激發(fā)光，從而獲得最佳的信噪比，其選擇主要是基于待測物質的熒光光譜特性，即需要能夠濾去雜散光、瑞利散射光以及部分雜質的熒光。在熒光測量中，熒光濾光片的設計目的是消除溶劑的拉曼散射光、瑞利散射光以及部分雜質的熒光。

在測試樣品發(fā)射光譜時，選擇比激發(fā)波長大20nm左右的濾光片，以使樣品發(fā)射的熒光透過但不會使激發(fā)光雜散光透過，減少背景光源的干擾。測試樣品激發(fā)光譜時，選擇比發(fā)射波長小20nm左右的濾光片，以確保發(fā)射波長阻隔，確保發(fā)射波長之前的光譜能有較好的信號。

優(yōu)秀的熒光濾光片應該要滿足與燃料的激發(fā)峰、發(fā)射峰匹配且交疊小，截止深度深，自發(fā)熒光小，以及透鏡面形好，利于熒光成像的提取。透鏡表面的平整度對成像質量有重要影響，波前扭矩或楔角的不利影響應盡可能減少。